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答案 1:
就我知道的寫一點補充吧。不確定提問者的“DNA碎片”指的是什么,不知道從哪里開始講起。從犯罪現(xiàn)場收集來的各種DNA證據(jù)(血液,頭發(fā),-等等大家都熟悉了)為的是能夠從中提取足夠多的DNA。根據(jù)能獲得的DNA的量不同,可能會采取不同的分析方法。建立DNA-Profile的基礎(chǔ)就是分析高度可變的重復(fù)序列,這種是在染色體上頻繁出現(xiàn)的“可變數(shù)目的重復(fù)序列 (VNTRs)[1] “,或者是”短重復(fù)序列 (STRs) [2] ”(算是VNTPs的一種),這些序列在不同人的身上以不同長度的組合出現(xiàn),近親間會非常相似,但在無親緣關(guān)系的人之間幾乎不可能會相同。這就是鑒定的理論基礎(chǔ)。過程就是提取細(xì)胞核DNA,通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR)[3] 對STR部位的片段進行指數(shù)級的擴增,因為之后的電泳會將這些片段按大小分離開來,所以總量必須夠大以保證分離之后得到的片段被檢測到。電泳的原理 @米叔 已經(jīng)講了,記得在幾年前一個講座里聽過現(xiàn)在鑒證科用的都是以毛細(xì)管電泳[4]為基礎(chǔ)的儀器,就是可以在很細(xì)的導(dǎo)管里用高壓使片段分子迅速分離,而且包括加螢光染料最后檢測對比的過程都可以實現(xiàn)自動化。分離之后,通過同時比對多個STR位點,就會給出一個條帶圖譜,以及這樣的圖譜在整個種群中出現(xiàn)的幾率,然后從統(tǒng)計學(xué)上給出一個帶有相同圖譜的人出現(xiàn)的可能性?;旧先绻麑Ρ?到15個這樣的位點,這個幾率就是幾百萬分之一。也就是說兩個沒有親緣關(guān)系的人幾乎不可能會有相同的STR圖譜。然后每個國家對建立和比對這種DNA-Profile都有不同的程序,在德國就是將取證得來的未知的DNA-Profile與已有罪犯及嫌疑人的數(shù)據(jù)庫對比,不過結(jié)果本身似乎也不能作為是否有罪的直接證據(jù)。另外也有其它方法來對DNA證據(jù)進行分析,比方使用線粒體DNA。線粒體DNA簡單來說就是一套除了我們通常所說的23對染色體基因組之外,存在于我們每個細(xì)胞的細(xì)胞器當(dāng)中的獨立的DNA。它的特點的拷貝數(shù)量大,所以在不能獲得足夠生物組織樣本的情況下可以使用。據(jù)說世貿(mào)大樓災(zāi)難里面的很多受難者都是通過這個方法確認(rèn)身份的。[1]en.-.org/wiki...[2]en.-.org/wiki...[3]en.-.org/wiki...[4] en.-.org/wiki...答案 2:
提問者是想知道儀器分析的步驟嗎?還是只是想知道在做這件事的時候人都在干什么?我都簡單講講吧。感謝邀請。基因結(jié)構(gòu)和序列梯子不同的DNA有不同的分子尺寸,我不確定,印象中電泳法是一種比較成熟的可以根據(jù)分子的尺寸來分離這些分子的方法。一塊玻璃板上涂上凝膠然后通低壓直流電,DNA樣本放在板子的負(fù)極上于是不同尺寸的分子就以不同的速度在凝膠上移動(可參考z-i-u/question...)。分子是從負(fù)極向正極作直線運動的,于是樣本并列在一起,十幾個小時之后DNA碎片就分離了(這個時候-概可以去喝喝咖啡睡睡覺什么的,沒有條件親手實驗,不敢亂說)。接下來就要考慮去測定那些個體碎片的位置,一般的方法是把凝膠浸入到一種溶液里面去,這種溶液能把雙股的DNA碎片分成單股(什么溶液沒記?。?,之后壓向一層塑料膜,單股碎片就被轉(zhuǎn)移到那膜上面去了。我們知道DNA是含有A、T、C、G四種堿基,經(jīng)過以上兩步之后現(xiàn)在這些可愛的小家伙們已經(jīng)在鏈上充分暴露,那么我們就可以使用探針來處理它們。一般這個過程被稱之為“標(biāo)記”。有一種探針是通過其他的途徑獲得的單股DNA小段,并被放射性原子所標(biāo)記過,探針里面的堿在片斷中找到它們的互補堿,然后再湊上去,和它們的“互補”混在一起。這一個步驟仍然是在膜上進行的,然后我們把膜清洗一下貼到X光膠片上,探針的放射性在膠片上產(chǎn)生一種映像,就是我們很熟悉的膠片上的一些像條碼一樣的點和帶,每一條帶代表著一個碎段。并排的條帶,分子結(jié)構(gòu)相同。說到高興處,再說一點吧?!毕拗菩云伍L度多態(tài)性“簡稱”RFLP“,這是DNA的標(biāo)準(zhǔn)程序,在美國也被稱之為“DNA分型”,產(chǎn)生的結(jié)果更容易被分析。這種分析方法是沿著股束檢測一部分相同堿順序的系列,被稱為“同相重復(fù)序列可變數(shù)”,簡稱“VNTR”,這種神奇的技術(shù)被命名為“DNA指紋術(shù)”,它可以識別多重基因座的探針,分辨能力比單基因座方法強很多。但是RFLP的限制在于可供分析的樣本可能會很小,于是又出現(xiàn)了“PCR”也就是“聚合酶鏈反應(yīng)”這種技術(shù),它能夠做的事非常重要——-。于是短時間內(nèi)就可以產(chǎn)生成百上千個,直到檢測人員擁有足夠用來分析的股束了!我們在CSI里看到的一些儀器,就是這個了。____________由于同專業(yè)是相關(guān)的以前研究過,具體已經(jīng)記不太清楚了,期待高人補充和解釋。答案 3:
首先進行DNA提取,這部分的步驟與《CSI》中所演的不同,劇集中簡化了。-/wiki...接著把提取的DNA扔進全自動分析儀就行了,你什么都不用干,無人值守式的全自動,去喝杯咖啡,上會網(wǎng),吃個飯,睡一覺,回來打印結(jié)果就行了,現(xiàn)在一般24小時內(nèi)就能搞定。下一篇:Macbook Pro鍵盤有必要帶鍵盤膜嗎?(正常使用灰塵會通過鍵盤進入到筆記本-嗎?) 下一篇 【方向鍵 ( → )下一篇】
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